抗体文库是指采用聚合酶链反应等手段在体外获得成套抗体可变区轻重链基因,将这些基因重组入一定的载体,转入适当的受体细胞或噬菌体中,这些抗体基因克隆的集合体。从该文库中能够表达和筛选出所需的单克隆抗体。目前主要利用噬菌体展示筛选技术或酵母表面展示技术来对抗体文库进行表达和筛选。
基于高通量测序的抗体文库测序能够检测原始合成的抗体文库抗体基因组成及各自丰度,用于实验前的QC工作。在进行抗原筛选后,抗体文库测序能够发现与抗原高亲和力结合的抗体序列,并用于下游优化合成表达。
抗体文库测序服务流程
以文库DNA为起始材料,特异性扩增BCR重链和轻链可变区, 构建测序文库并进行高通量测序。采用Illumina MiSeq 300PE平台, 获得完整的基因可变区;或采用PacBio三代测序获得抗体转录本全长序列。

抗体文库测序送样要求
- DNA 样品总量: ≥200 ng;菌体样本:>4ml(对数期);
- 样本物种包括:人,小鼠,猪,狗,骆驼等IMGI数据库中已有参考抗体基因的物种。
抗体文库测序周期和交付结果
- 交付周期:10-15个工作日;
- 测序数据量:重链轻链各自提供大约0.5-1百万条测序读长(0.5-1M),全长三代测序提供5千-1万条测序读长序列;
- 交付结果:
- 基本数据QC及统计;
- 比对物种参考抗体基因序列库并进行统计分析;
- 克隆序列特征注释: CDR1/2/3, FR1/2/3/4核酸序列,氨基酸序列注释;
- 样本克隆群体特征分析:CDR3序列长度分析,VDJ基因频率统计及V-J基因组合频率分析;
- 样本间比较分析:测序饱和度分析,样本间相关性分析等。
抗体文库测序服务优势
- 全方位服务,提供从VDJ扩增,建库,测序和生信分析一站式服务;
- 采用准确的扩增引物体,全面提升可变区序列检出;
- 丰富的分析内容,提供可变区序列,抗体基因,多样本比较等全方位分析服务;
- 合理的价格及快速的服务周期,帮助客户提高生产效率。