杂交瘤细胞在保存过程中存在抗体基因丢失、细胞状态不好影响抗体产生，甚至细胞死亡的情况，为将优秀抗体长期保存、稳定生产，可将杂交瘤细胞中的抗体基因提取并测序，最终拿到核苷酸序列，并以 DNA 形式保存，用于后期外源表达及生产。杂交瘤细胞抗体测序所获取的杂交瘤细胞单克隆抗体基因序列，是发表文章或专利必须信息和重组表达工程抗体的前提之一，同时也是抗体人源化工作的基础。
我公司利用RACE（Rapid Amplification of cDNA Ends)技术和公司特有的抗体特异引物集进行杂交瘤抗体基因测序。通过利用Illumina Miseq测序平台，能够低成本和短周期的完成序列测序工作，得到准确的抗体VDJ基因序列。
杂交瘤抗体基因测序服务流程
杂交瘤抗体基因测序送样要求
- 提供数量>1×10^6经Trizol处理的细胞，处理方法如下：
- 将培养的细胞和上清进行吹打，细胞量不少于1×10^6，要活细胞且状态良好；
- 收到细胞，离心，弃上清留沉淀，根据细胞量加1-2ml Trizol （1×10^6加1mL，5×106-1×10^7加2mL,1×10^8加3mL），-80℃保存，准备提 RNA；
- 提供杂交瘤细胞种属来源信息及抗体亚型信息；
杂交瘤抗体基因测序周期和交付结果
- 交付周期：3-5个工作日
- 交付内容：
- 100%准确的抗体重链及轻链VDJ全长氨基酸和核酸序列；
- VDJ全长序列对应的FR1/2/3/4, CDR1/2/3注释信息；
- Word及PDF版的分析报告，方便项目汇报和归档 ；
杂交瘤抗体基因测序服务优势
- 3-5个工作日急速交付测序结果，加速单克隆抗体基因序列发现和研究生产速度；
- 采用特有的5′ RACE扩增技术，大大提升序列测序成功率，并能获得单克隆基因的所有序列信息；
- 采用高通量测序方法可高效对抗体基因重轻链可变区序列进行测序；
- 经验丰富的引物设计及抗体基因分析能力；
- 多种属（人，小鼠，大鼠，兔等）多亚型（IgG1, IgG2a, IgG2b, IgM 等）抗体均可进行基因提取；
- 可提供从杂交瘤抗体基因测序 — 抗体基因合成— 序列密码子优化 — 抗体蛋白表达— 抗体蛋白亲和力验证等整体服务；
